MHF组蛋白折叠复合体组分编码基因 MHF1 过表达对重组酿酒酵母纤维素酶生产的影响

背景重组酿酒酵母可用于生产多种药用蛋白和工业酶等外源蛋白，但蛋白分泌水平低是限制其异源蛋白高效生产的重要因素。异源蛋白表达和分泌过程可能会对宿主细胞产生多种胁迫，因此，研究胁迫响应相关基因对重组酵母异源蛋白生产的影响具有重要意义。Mhf1p是MHF组蛋白折叠复合体的组分之一，与DNA损伤修复及维持基因组稳定性有关，但其对异源蛋白生产的作用尚不清楚。 目的研究 MHF1 过表达对重组酿酒酵母蛋白生产的影响。 方法在分泌表达纤维素酶的重组酿酒酵母菌株中利用基于CRISPR-Cas9的基因组编辑技术整合过表达 MHF1 ，分析其对产酶的影响，并探讨影响产酶的分子机理。 结果与出发菌株相比，过表达 MHF1 菌株的外切纤维素酶CBH酶活性提高了38%。对过表达 MHF1 的CBH生产菌株中蛋白合成和分泌途径相关基因转录水平进行检测，发现与对照菌株相比， CBH1 基因和与分泌相关的 SEC22 、 ERV29 等基因在不同时间点呈现不同程度显著上调。 结论 MHF1 过表达可促进酿酒酵母异源外切纤维素酶的生产，并影响外源酶基因和分泌途径基因的表达，可能通过对多基因的协同表达影响促进产酶。