Avaliação da suscetibilidade a antifungicos de dermatofitos do genero Microsporum

Dermatofitos do genero Microsporum acometem preferencialmente pele e pelos, sendo M.canis e M.gypseum as especies mais isoladas em nosso meio. Antifungicos topicos e sistemicos sao indicados para o tratamento destas dermatofitoses, que e considerado mais dificil quando comparado ao de outros generos de fungos queratinofilicos. Deste modo, a determinacao da suscetibilidade aos antifungicos in vitro destes microrganismos e de interesse para embasamento da terapeutica empirica, avaliacao de falhas terapeuticas, e testes de novos antifungicos. No entanto, os dermatofitos nao foram incluidos no documento relacionado do CLSI (M38-A, 2002). Os estudos disponiveis ate o momento, utilizando conidios dos fungos, apresentam resultados muito divergentes, devido a falta de padronizacao e o grande numero de variaveis pre-analiticas envolvidas. Em adicao, uma vez que a forma de hifas predomina no tecido infectado, ha controversias sobre o fato de se a forma conidial seria adequada para os testes. Ha poucos relatos na literatura sobre avaliacao dinâmica de crescimento de fungos e a taxa de inibicao destes por drogas antifungicas, mas nenhum destes realizados com dermatofitos. Este estudo se propos a determinar condicoes para realizacao do teste de suscetibilidade pelo metodo de microdiluicao em caldo e padronizar a avaliacao de crescimento dinâmico pelo sistema BCT® para seis cepas do genero Microsporum, determinando respectivamente CIM e CFM e taxas de inibicao de crescimento frente a ciclopirox olamina, terbinafina e griseofulvina. Os resultados obtidos apontaram: agar batata como o melhor meio de cultura para producao de conidios, inoculo de 1x 103 celulas/ml, incubacao de 7 dias a 28oC e leitura final considerando 100% de inibicao do crescimento para o teste de microdiluicao em caldo. Os resultados de CIM variaram de 1,0 a 16,0 µg/ml para ciclopirox olamina, de 0,005 a 0,004 µg/ml para terbinafina e de 2,5 a 20,0 µg/ml para griseofulvina. No Sistema Automatizado BioCell-Tracer® os testes foram realizados com: concentracao de PLL de 0,05%; inoculo ? 1x106 conidios/ml em 5?l; incubacao a 30oC por 72 a 96h; 30oC como temperatura de realizacao do teste e tempo total de experimento de 3 horas e 30 minutos. Todas as cepas apresentaram taxa de inibicao de crescimento acima de 85% na fase de exposicao a droga frente aos antifungicos avaliados, na concentracao equivalente ao resultado de CIM obtido pela tecnica de microdiluicao em caldo e, em pelo menos, uma diluicao abaixo Abstract