刺参( Apostichopus japonicus )大水面养殖池塘环境中优势益生菌筛选及其特性分析

2014年12月–2015年12月，在大连地区刺参( Apostichopus japonicus )大水面养殖池塘进行了春、夏、秋、冬四季有益菌分离筛选，从其水体和底泥中共分离得到66株细菌。以刺参“腐皮综合征”主要病原菌——灿烂弧菌( Vibrio splendidus )和假交替单胞菌( Pseudoalteromonas nigrifaciens )为指示菌进行拮抗作用实验，利用选择培养基对菌株产淀粉酶和蛋白酶的能力进行测定，最后通过安全性实验得到潜在益生菌株YQ-2。结果显示，该菌株对灿烂弧菌和假交替单胞菌有较强的抑制作用，抑菌圈分别达到22 mm和24 mm；对淀粉和蛋白选择培养基水解圈的直径达到22 mm和36 mm。安全性实验显示，该菌株无论是在10 8 CFU/ml浸浴还是投喂10 8 CFU/g的粉末饲料感染，30 d内供试刺参没有发病和死亡现象，健康程度好，且相对于对照组的体重明显增长，10 8 CFU/g粉末饲料投喂组的相对增长率达到39.31%。此外，本研究对YQ-2菌株的生理生化指标、16S rDNA序列进行了分析，其同源性与枯草芽孢杆菌 Bacillus subtilis strain KLP2015相似度达99%，故将该菌株鉴定为枯草芽孢杆菌。该株枯草芽孢杆菌在大水面刺参池塘四季水体中数量为140–280 CFU/ml，高于其他菌株；同时，该菌株在水体中还具有较高的优势度，优势度分别为4.2%、3.5%、2.6%、4.6%，冬、春季节的优势度明显高于夏、秋季节；它属于土著分离菌株，对引起刺参腐皮综合征的2株病原菌具有较强的抑制作用，这对刺参大水面生态养殖具有较大的应用潜力。