Avaliação da resposta humoral a antígenos de Lacazia loboi utilizando sorosde pacientes com lacaziose

A doenca de Jorge Lobo e uma micose da pele e do tecido subcutâneo causada pelo fungo Lacazia loboi que apresenta muitas semelhancas fenotipicas com o Paracoccidioides brasiliensis. Pela dificuldade do cultivo de L. loboi em laboratorio, torna-se problematica a caracterizacao de suas proteinas antigenicas e o isolamento de seu DNA-genomico. Por isso, a maior parte dos estudos sorologicos publicados ate hoje foi feita utilizando antigenos de P. brasiliensis. O objetivo do presenteestudo foi avaliar a resposta humoral a antigenos de celulas leveduriformes de L. loboi extraidos de camundongos experimentalmente infectados com o fungo. Neste estudo, antigenos de L. loboi foram obtidos a partir de infeccao em modelo animal.Camundongos BALB/c foram inoculados com extratos de leveduras preparados a partir de fragmentos de biopsia retirados de lesoes de pacientes infectados com L. loboi. Seis meses apos o inoculo os camundongos desenvolveram lesoes tipicas no coxim traseiro. Fragmentos do coxim dos camundongos sacrificados, contendofungos viaveis, foram macerados e filtrados em condicoes estereis para eliminar detritos. Os antigenos de L. loboi foram extraidos e mantidos a -20oC. A glicoproteina gp43 de P. brasiliensis obtida com a utilizacao da cepa Pb18, foi purificada do concentrado de exantigeno e a solucao final foi aplicada em coluna de CNBr-4B aderida a anticorpos monoclonais de gp43 17c por cromatografia de afinidade. Realizou-se analise por Western blotting em 24 soros de pacientes com lacaziose, cinco soros de pacientes com paracoccidioidomicose e em soros de cincovoluntarios procedentes de area nao endemica. O mesmo procedimento foi feito com soros de seis camundongos infectados e nove camundongos sadios. Os anticorpos da classe IgG nos soros de todos os pacientes e camundongos com lacaziose reconheceram um antigeno de ~ 193kDa. A gp43 de P. brasiliensis purificada foiidentificada pelos anticorpos IgG de todos os soros de doentes avaliados, mas estes anticorpos nao revelaram a mesma molecula antigenica nos extratos proteicos de celulas leveduriformes de L. loboi. Os soros de voluntarios sadios e de camundongos controle nao reagiram com os antigenos utilizados neste estudo. A caracterizacao molecular dos antigenos identificados, especialmente a proteina de193kDa, pode ser importante para o desenvolvimento de novos tratamentos, imunoterapia, vacinas e testes diagnosticos para a lacaziose.