STCH减弱Aβ_（25-35）对SH-SY5Y培养细胞神经毒性作用的初步研究

目的：研究应激和分子伴侣蛋白（stress and chaperon,STCH）拮抗β淀粉样蛋白（beta-amyloid25-35,Aβ25-35）在体外对人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y毒性的机制。方法：用Aβ25-35（20μmol/L）在不同时间点分别处理SH-SY5Y培养细胞,然后采用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）和蛋白印记（Western Blot）法检测内质网应激相关分子的表达和c-Jun amino-terminal kinase（JNK）的磷酸化,并采用负载钙荧光探针（acetoxymethyl ester ofFura-2,Fura-2AM）钙成像技术检测过表达STCH对100nmol/L星孢霉素（staurosporin）引起的钙超载的情况。结果：Aβ25-35处理SH-SY5Y细胞后引起STCHmRNA表达上调,在3h开始升高,12h达到高峰,然后下降;而葡萄糖调节蛋白94（glucose-regulated protein94,Grp94）则于处理后6h表达上调,9h达到高峰,然后快速下降。Aβ25-35处理SH-SY5Y细胞能够激活JNK通路,致其磷酸化增加,过表达STCH,能够抑制JNK的磷酸化。过表达的STCH能够显著拮抗stauroposrine引起的游离钙增加。结论：STCH可能通过拮抗游离钙增加,抑制JNK通路而发挥保护神经元的作用,这将为我们寻找神经保护的策略提供有益的线索。