Monoclonal antibody anti-AFB1: scale-up in vitro for biotools development.

Aflatoxina B 1 (AFB 1 ) e uma micotoxina classificada pela International Agency for Research on Cancer - IARC no Grupo 1 (carcinogeno ao humano), responsavel pelo perigo de contaminacao em ampla variedade de alimento e racao, cujo monitoramento depende de metodologia analitica precisa e exata. O trabalho visou cultivo do hibridoma secretor de anticorpo monoclonal ( AcM) especifico para AFB 1 visando desenvolvimento de metodos imunoquimicos. Hibridoma AF2 foi cultivado em meio RPMI + 15 % de soro fetal bovino (SFB), assim como o mesmo meio com adicao gradual de meio H-SFM (25, 50, 75 e 100 % H-SFM). A concentracao proteica obtida no sobrenadante de cultura variou de 1,80 a 10,88 mg/mL. A introducao de meio sintetico H-SFM isento de SFB permitiu obtencao de reagente com maior pureza e menor perigo , ja que cultivos com maior proporcao de H-SFM apresentou menor teor proteico (2,29 mg/mL em 100 % de H-SFM), sendo este provavelmente proximo ao teor real de AcM puro. O ensaio imuno enzimatico competitivo indireto ( ic-ELISA) e eletroforese em gel de poliacrilamida com SDS (SDS-PAGE) demonstraram atividade antiAFB 1 e bandas correspondentes ao IgG, respectivamente, indicando viabilidade da aplicacao de AcM produzido em 100, 75 e 50 % H-SFM para o desenvolvimento de bioferramentas para deteccao de AFB 1 . Esta producao de AcM abre perspectiva perante autossuficiencia de reagentes essenciais no diagnostico rapido em condicao nacional, contribuindo na qualidade e seguranca de alimentos.