P187 Implication des espèces actives de l’oxygène (EAOs) et des canaux Transient Receptor Potential Canonical (TRPC) dans la sensibilité au glucose des neurones hypothalamiques

Introduction L'hypothalamus ventro-median (VMH) renferme des neurones gluco-excites suggeres comme impliques dans le controle de l'homeostasie glucidique. Hormis l'implication d'un canal ionique a conductance cationique non-selective (CCNS), les mecanismes mis en jeu dans la reponse au glucose de ces neurones sont inconnus. Des especes actives de l'oxygene d'origine mitochondriale (mEAOs) sont produites dans le VMH lors d'hyperglycemie et participent aux voies de signalisation sous-tendant la detection du glucose. Certains canaux de la famille des « transient receptor potential-canonical » (TRPC), presentent une CCNS et sont modules par les mEAOs. Nous emettons l'hypothese qu'une voie de signalisation mEAOs-TRPC-dependante est impliquee dans la reponse au glucose des neurones gluco-excites Materiels et methodes In vitro : l'activite de cellules dissociees de VMH de rats est enregistree par imagerie calcique en reponse a l'augmentation de la concentration en glucose de 2,5 a 10mM, en presence d'inhibiteurs de canaux TRPC ou d'antioxydants. In vivo : la detection hypothalamique de l'hyperglycemie est evaluee en mesurant la secretion d'insuline induite par l'injection intra-carotidienne d'un bolus de glucose, en presence d'inhibiteurs de canaux TRPC dans le VMH. Resultats Le nombre de cellules gluco-excitees diminue de 60 % en presence d'antioxydants (trolox et glutathion). L'intensite des reponses calciques au glucose des cellules gluco-excitees diminue significativement de 75 % ou totalement (100 %) en presence des inhibiteurs TRPC 2-Aminoethoxydiphenylborate ou SKF96365, respectivement. Des donnees de RT-PCR montrent que les canaux TRP-C2,3,4,6 sont exprimes dans le VMH. L'expression de ces canaux specifiquement dans les neurones gluco-excites est en cours d'exploration par RT-PCR sur cellule unique. In vivo, des donnees preliminaires montrent que l'inhibition pharmacologique de canaux TRPC3 diminue la secretion d'insuline induite par l'injection intra-carotidienne de glucose. Conclusion Une voie de signalisation mEAOs-TRPC joue un role dans la detection hypothalamique du glucose par les neurones gluco-excites et participerait au controle de l'homeostasie glucidique.