小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化过程中α-玉米赤霉醇对 PINP 和 BMP -2表达的影响
2015
目的:探讨小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化过程中α-玉米赤霉醇(α-ZAL )对Ⅰ型前胶原 N 端前肽(PⅠNP)和骨形态发生蛋白-2(BMP -2)表达的影响。方法采用全骨髓培养差速贴壁法体外分离培养小鼠骨髓间充质干细胞,取第3代细胞分为空白诱导组、阳性诱导组及高、中、低浓度α-ZAL 诱导组。空白诱导组仅加入成骨条件培养基,阳性诱导组加入等量成骨条件培养基及雌二醇,高、中、低浓度α-ZAL 诱导组分别加入成骨条件培养基及梯度浓度(10-5、10-6、10-7 mol /L)的α-ZAL。采用 ELISΑ法测定 PⅠNP 和 BMP -2的表达量。结果小鼠骨髓间充质干细胞原代培养呈长梭形,有接触抑制现象,诱导后细胞呈三角形、多角形、不规则形状,细胞生长密集时可重叠生长。与空白诱导组比较,各组 PⅠNP 表达量均明显升高(P <0.01),阳性诱导组及低、中浓度α-ZAL 诱导组 BMP -2表达量均明显升高(P <0.01),高浓度α-ZAL 诱导组 BMP -2表达量明显下降(P <0.01)。与阳性诱导组比较,低浓度α-ZAL 诱导组 PⅠNP 表达量明显升高(P <0.01),而中、高浓度α-ZAL诱导组 PⅠNP 表达量明显下降(P <0.01),低、中浓度α-ZAL 诱导组 BMP -2表达量均明显升高(P <0.01),高浓度α-ZAL 诱导组 BMP -2表达量明显下降(P <0.01)。结论α-ZAL 呈剂量相关性促进体外培养的小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化,低浓度(10-7 mol /L)α-ZAL 可显著促进骨髓间充质干细胞骨向分化过程中 PⅠNP 和BMP -2的表达,随着剂量的升高,促进作用下降。
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