Optimisation d'un test in vitro de la cytocompatibilité des biomatériaux en culture organotypique

L'essor des biomateriaux et leur utilisation dans le domaine medical ainsi que le developpement des methodes alternatives aux tests in vivo sont a l’origine des techniques permettant de mesurer la cytocompatibilite et la cytotoxicite des materiaux. Un modele base sur la culture organotypique, permet d'evaluer la cytocompatibilite et la cytotoxicite des materiaux au contact des tissus. Il repose sur la mesure de trois proprietes : la multiplication cellulaire, la migration cellulaire et l'adhesion des cellules au substrat. Ce travail a eu pour objet l'optimisation et la validation du modele. L'optimisation a porte sur le developpement d'une technique automatisee de la mesure de la viabilite cellulaire, utilisant un analyseur de particules multicanaux et qui a permis d'integrer la viabilite comme quatrieme parametre de mesure au sein du modele. La viabilite cellulaire est un facteur determinant de la mesure de la toxicite. Puis dans le but d'appliquer la technique a d'autres tissus, nous avons realise la culture organotypique de peau humaine en etudiant differentes caracteristiques : la multiplication, la migration, l'adhesion, la viabilite cellulaires et la synthese de matrice extracellulaire. La validation du modele a ete realisee par deux analyses. La sensibilite du modele a ete prouvee en etudiant le comportement du tissu cutane embryonnaire, adulte et transforme preleve sur la souris. Dans le cadre de l'etude de la biocompatibilite de materiaux destines a etre places au contact de la peau humaine, nous avons realise en parallele une etude la cytocompatibilite et de la cytotoxicite en culture organotypique et en culture cellulaire. Les deux techniques de culture repondent avec la meme sensibilite.