miR-103a-3p在胰腺癌细胞中的表达及意义

2015 
目的:观察mi R-103a-3p抑制表达的慢病毒载体对高表达mi R-103a-3p的PANC-1胰腺癌细胞株的表达抑制作用,为阐明胰腺癌的发病机制及筛选治疗靶基因提供理论依据。方法:采用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测不同侵袭能力的胰腺癌细胞株(PANC-1、Bx PC-3)和永生化正常胰腺细胞(H6C7)中mi R-103a-3p表达情况;构建慢病毒载体mi R-103a-3p-inhibitor,包装后感染高表达mi R-103a-3p的PANC-1细胞株,荧光显微镜观察其转染效率,q RT-PCR检测其表达情况。结果:q RT-PCR检测显示,mi R-103a-3p在PANC-1、Bx PC-3细胞及正常胰腺细胞H6C7细胞中相对表达量分别为(4.949±0.130)、(1.417±0.120)和(1.010±0.151),PANC-1表达水平最高(P〈0.05)。mi R-103a-3p-inhibitor慢病毒感染PANC-1细胞第4天,荧光显微镜下可见报告基因绿色荧光蛋白(GFP)高强度表达。q RT-PCR结果显示:mi R-103a-3p相对表达量在未感染mi R-103a-3p-inhibitor慢病毒的PANC-1组(1.002±0.160)与阴性病毒感染的PANC-1组(0.956±0.250)间差异无显著性,但慢病毒感染的PANC-1组的相对表达量(0.317±0.320)显著下降(P〈0.05)。结论:mi R-103a-3p在侵袭能力较强的胰腺癌细胞株中表达增高,mi R-103a-3p-inhibitor能稳定转染PANC-1细胞系并抑制其mi R-103a-3p表达。
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