假交替单胞菌Pseudoalteromonas sp.AJ5产κ-卡拉胶酶的培养条件优化

【目的】本研究的目的是优化Pseudoalteromonas sp．AJ5菌株的培养条件使之产生高活性的胞外κ-卡拉胶酶。【方法】通过富集培养技术从刺参肠道分离出一株卡拉胶降解菌AJ5，该菌株能利用卡拉胶作为惟一碳源和能源。依据形态学和生理学特征及16S rRNA基因序列分析，将该菌株鉴定为假交替单胞菌属（Pseudoalteromonas）。通过单因素试验和正交试验对Pseudoalteromonas sp．AJ5菌株产胞外κ-卡拉胶酶的培养条件进行了优化。【结果】单因素试验结果表明，Pseudoalteromonas sp．AJ5菌株的最佳培养条件为250mL三角瓶装入75mL发酵培养基、摇床转速150r／min、接种量7％、pH8．0。单因素试验和正交试验结果显示该菌株的最佳培养基组成为κ-卡拉胶1g／L、牛肉膏2g／L、NaCl 20g／L、K2HPO4·3H2O 1g／L、MgSO4·7H2O 0．5g／L、MnCl2·4H2O 0．2g／L、FePO4·4H2O 0．01g／L；培养温度为28℃，培养时间为28h。【结论】Pseudoalteromonas sp．AJ5菌株分泌胞外κ-卡拉胶酶，在最佳培养条件下，该菌株的κ-卡拉胶酶活力比优化前提高了4倍。