高效液相色谱-三重四级杆质谱分析海洋甲壳动物淋巴和肌肉中的20-羟基蜕皮酮

在三疣梭子蟹（Portunus trituberculatus）血淋巴中加入高油菜素内酯作为内标,用乙腈去除蛋白,采用高效液相色谱-三重四级杆质谱（HPLC-QqQ MS）对20-羟基蜕皮酮进行分析;对3种甲壳动物（三疣梭子蟹、脊尾白虾（Palaemon carincauda Holthuis）和口虾蛄（Oratosquilla oratoria））的肌肉则采用甲醇提取、正己烷脱脂,加入高油菜素内酯作为内标进行分析。在电喷雾电离源正离子模式下,分别取m/z445.2和109.1作为蜕皮激素和内标的定量目标离子进行检测。结果表明,蜕皮激素和内标在Hypersil Gold C18色谱柱上得到良好分离,在0～50μg/L范围内线性相关系数为0.9978,方法的检出限为0.03μg/L。三疣梭子蟹血淋巴中蜕皮激素回收率达91.8%～99.2%,相对标准偏差小于7.1%;3种甲壳动物肌肉中蜕皮激素回收率达85.7%～91.2%,相对标准偏差小于7.3%。对采自浙江宁波3批三疣梭子蟹血淋巴及三疣梭子蟹、脊尾白虾和口虾蛄的肌肉进行测定,三疣梭子蟹血淋巴中游离20-羟基蜕皮酮平均浓度在2.43～2.86μg/L范围内,而3种甲壳动物肌肉中20-羟基蜕皮酮平均含量在4.8～9.6ng/g范围内。