关于细菌人工染色体（BAC）文库载体DNA制备的研究

细菌人工染色体(BAC)文库在基因组研究中起着关键作用.构建BAC文库的一个关键步骤就是BAC载体DNA的制备.制备高质量的BAC载体DNA受到包括酶切、脱磷等诸多因素的影响.以BAC载体pECBAC1为材料,分别采用限制性内切酶BamHⅠ和HK脱磷酶对其进行酶切和脱磷,并结合凝胶回收纯化技术,制备了可用于进一步构建BAC文库的线性载体DNA.并在此基础上,确定了制备BAC载体DNA的适宜条件,其中包括确定适宜限制内切酶用量及酶切时间,脱磷酶种类及浓度和凝胶回收纯化线性载体DNA等关键步骤.