Studies on the Function of Human Anti-HSP60 Monoclonal Antibody Fab

"국문요약 i 차 례 iv 그림차례 iiiv I 서 론 1 II 재료 및 방법 - 4 A. 인간 단클론 HSP60-45 항체 Fab의 생산 및 순수 정제 - 4 1. 재조합 인간 단클론 HSP60-45 항체 Fab의 DNA를 TOP10F` 세포로 형질 전환 - 4 2. IPTG 예민성 클론 선별 - 4 3. 용해성 Fab 발현 및 periplasmic soluble extract의 분리 - 5 4. 용해성 Fab 정제 - 5 5. SDS-PAGE & Immunoblotting - 6 B. 대식세포에서 열충격 단백질-60의 결합과 섭취에 미치는 인간 단클론 HSP60-45항체 Fab의 효과 분석 - 6 1. 세포 배양 - 6 2. 열충격 단백질-60의 형광표지 - 7 3. 대식세포에서 열충격 단백질-60의 결합 분석 - 8 4. 대식세포에서 열충격 단백질-60의 결합을 억제하는 인간 단클론 HSP60-45 항체 Fab의 결합 저해 효과 분석 - 8 5. 대식세포에서 열충격 단백질-60의 섭취 분석 - 8 6. 대식세포에서 열충격 단백질-60의 섭취를 억제하는 인간 단클론 HSP60-45 항체 Fab의 섭취 저해 효과 분석 - 9 7. 형광현미경을 이용한 HSP60-45 항체 Fab의 항원 특이적 억제 효과 - 9 C. 열충격 단백질-60에 의한 대식세포에서의 pro-inflammatory cytokines 유도에 미치는 인간 단클론 HSP60-45 항체 Fab의 효과 분석 - 10 1. 열충격 단백질-60에 의한 대식세포에서의 TNF-a 생산 - 10 2. 대식세포에서 열충격 단백질-60에 의한 TNF-a 생산을 억제하는 인간 단클론 HSP60-45항체 Fab의 효과 분석 - 10 3. 열충격 단백질-60에 의한 대식세포에서의 IL-6 생산 - 11 4. 대식세포에서의 열충격 단백질-60에 의한 IL-6 생산을 억제하는 인간 단클론 HSP60-45 항체 Fab의 효과 분석 - 12 5. 열충격 단백질-60에 의한 대식세포에서의 nitric oxide 생산 - 12 6. 대식세포에서의 열충격 단백질-60에 의한 nitric oxide 생산을 억제하는 인간 단클론 HSP60-45 항체 Fab의 효과 분석 - 13 7. 열충격 단백질-60의 대식세포에서의 생물학적 활성이 dotoxin 오염의 영향인지를 확인 - 13 III 결 과 - 14 A. 인간 단클론 HSP60-45 항체 Fab의 분리 정제 및 확인 - 14 B. 대식세포에서 열충격 단백질-60의 결합과 섭취에 미치는 인간 단클론HSP60-45항체 Fab의 효과 분석 - 16 1. 대식세포에서 열충격 단백질-60의 결합 분석 - 16 2. 대식세포에서 열충격 단백질-60의 결합을 억제하는 인간 단클론 HSP60-45 항체 Fab의 효과 분석 - 16 3. 대식세포에서 열충격 단백질-60의 섭취 분석 - 17 4. 대식세포에서 열충격 단백질-60 섭취를 억제하는 인간 단클론 HSP60-45 항체 Fab의 효과 분석 - 17 5. 형광현미경을 이용한 HSP60-45 항체 Fab의 항원 특이적 억제 효과 - 23 C. 열충격 단백질-60에 의한 대식세포에서의 pro-inflammatory cytokines 유도에 미치는 인간 단클론 HSP60-45 항체 Fab의 효과 분석 - 26 1. 열충격 단백질-60에 의한 대식세포에서의 TNF-a 생산 - 26 2. 대식세포에서 열충격 단백질-60에 의한 TNF-a 생산을 억제하는 인간 단클론 HSP60-45항체 Fab의 효과 분석 - 26 3. 열충격 단백질-60에 의한 대식세포에서의 IL-6 생산 - 27 4. 대식세포에서의 열충격 단백질-60에 의한 IL-6 생산을 억제하는 인간 단클론 HSP60-45 항체 Fab의 효과 분석 - 28 5. 열충격 단백질-60에 의한 대식세포에서의 nitric oxide 생산 - 28 6. 대식세포에서의 열충격 단백질-60에 의한 nitric oxide 생산을 억제하는 인간 단클론 HSP60-45 항체 Fab의 효과 분석 - 29 7. 열충격 단백질-60의 대식세포에서의 생물학적 활성이 endotoxin 오염의 영향인지를 확인 - 29 IV. 고 찰 - 39 V. 결 론 - 41 참고 문헌 - 42 ABSTRACT - 47 "