A53T α-synuclein抑制SH-SY5Y细胞2型囊泡单胺转运体的表达

目的研究稳定表达A53Tα-synuclein对神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞中2型囊泡单胺转运体（VMAT2）蛋白表达的影响。方法构建A53Tα-synuclein真核表达载体,用脂质体lipofectamineTM2000转染SHSY5Y细胞,经G418筛选获得稳定转染单克隆细胞株;分别采用Western blotting及DCFH-DA染色检测细胞系A53Tα-synuclein过表达对VMAT2蛋白的表达及细胞内活性氧类物质（ROS）水平的影响。结果 Western blotting结果显示VMAT2的表达在稳定表达A53Tα-synuclein的细胞系中明显降低。DCFH-DA染色结果显示稳定表达A53Tα-synuclein细胞系内DCF signal（507.3±7.1）较对照组（410.7±10.5）明显增多（P〈0.05）。结论 A53Tα-synuclein能够通过抑制VMAT2的表达,增加细胞内的ROS水平,在帕金森病的发病过程中发挥重要作用。