Effects of chronic HBV infection on human hepatic cytochrome P450 3A4

目的 探讨慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染对人肝脏细胞色素酶3A4(CYP3A4)的影响,为慢性HBV感染患者安全用药提供指导.方法 收集慢性HBV感染患者和正常人的肝组织标本,匀浆后以差速离心法制备成微粒体.以睾丸酮为探针底物,用高效液相色谱(HPLC)方法建立体外检测CYP3A4酶代谢活性的技术平台,检测两组肝组织样本中CYP3A4的酶活性.以Western印迹法测定了两组肝组织样本中CYP3A4蛋白的表达差异.结果 HPLC检测显示,反映酶活力的指标Vmax:慢性HBV感染组为(493±297)pmol·min-1·mg-1,正常对照组为(741±189)pmol·min-1·mg-1,两组差异有统计学意义(P=0.03),而酶系特征性常数Km值两组分别为:(0.142±0.057)μmol/L,(0.121±0.024)μmol/L,差异无统计学意义(P=0.103).Western印迹测定CYP3A4蛋白表达两组差异有统计学意义(P=0.003),慢性HBV感染组CYP3A4蛋白表达为3.0±1.6,低于正常组的表达量(5.7±1.5).各样本酶活性和蛋白表达的相关系数为0.7683(P＜0.01),表明酶活性与蛋白表达呈现良好的相关性.结论 慢性HBV感染可降低肝脏CYP3A4酶蛋白的表达,导致酶活性下降,但是对酶的结构未产生影响.提示慢性HBV感染者在使用由CYP3A4代谢的药物时,要重视由于代谢变化导致的副作用。