Obtención y caracterización de derivados inmovilizados de extracto celular a agrobacterium radiobacter en quitina y quitosano

En esta tesis se ha obtenido un biocatalizador inmovilizado a partir de un extracto celular de Agrobacterium radiobacter para la sintesis de un D-aminoacido de interes industrial, la p-hidroxifenilglicina (p-HPG). El extracto celular contiene dos actividades enzimaticas, D-hidantoinasa y D-carboamilasa, que transforman el sustrato de partida, la p-hidroxifenil-hidantoina, en el producto final, p-hidroxifenilglicina. Como soportes para la inmovilizacion, se han utilizado polimeros de origen natural; quitina y quitosano obtenidos a partir de deshechos de la industria pesquera y alginato de origen comercial. Se han ensayado tres metodos de inmovilizacion, la inmovilizacion coavalente, por adsorcion y la encapsulacion. En los dos primeros, se ha estudiado el efecto de las caracteristicas fisico-quimicas de la quitina y del quitosano. En el tercer metodo, se han preparado complejos polielectrolitos de alginato-quitosano en los que se ha estudiado el efecto del modo de preparacion y de las caracteristicas del quitosano empleado (peso molecular y grado de acetilacion). En todos los metodos ensayados, se han obtenido derivados que presentan ambas actividades enzimaticas y por tanto validos para la sintesis de p-HPG. En todos los casos, los derivados se han optimizado modificando distintas variables de la reaccion, tamano de soporte. Los derivados optimziados se han caracterizado con respecto al efecto de la temperatura y pH en su actividad y estabilidad, reutilizacion y estabilidad durante el almacenamiento. De los soportes estudiados, la quitina ha dado mejores rendimientos que el quitosano tanto en la inmovilizacion covalente como en la inmovilizacion por adsorcion. De las quitinas estudiadas la obtenidas a partir de caparazon de gambas (Ploeticus mulleri) y de langostino (Penaeus caramote) han presentado los rendimientos mas elevados. Los derivados obtenidos por adsorcion o por enalce no son