白花丹醌对大鼠肝星状细胞活性氧及TGF-β1/Smad信号通路的影响

目的研究白花丹醌对大鼠原代分离肝星状细胞(HSC)活性氧(ROS)水平、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Smad2/3、p-Smad2/3、Smad7蛋白表达的影响。 方法分离原代大鼠HSC，接种活化期HSC，进行α-SMA免疫荧光鉴定，分为空白组、TGF-β1组、NADPH氧化酶抑制剂组(DPI)、白花丹醌低、中、高剂量(2、4、8 μmol·L-1)组。MTT检测白花丹醌对HSC增殖的影响；显微镜下观察白花丹醌对HSC形态学的影响；荧光探针法测定HSC内ROS表达水平；Western blot检测HSC中Smad2/3、p-Smad2/3和Smad7蛋白表达。 结果经α-SMA免疫组织荧光鉴定，阳性率达91%，表明获得高纯度的大鼠原代HSC。MTT测定白花丹醌最佳给药浓度为2、4、8 μmol·L-1；DPI组和白花丹醌各浓度组可不同程度下调HSC内ROS的表达；Western blot结果显示，与模型组比较，DPI和白花丹醌给药组Smad2/3、p-Smad2/3的蛋白表达降低，Smad7蛋白表达增加。 结论白花丹醌可能是通过下调ROS水平，进而降低Smad2/3和p-Smad2/3的表达，从而发挥抗HSC活化的作用。