靶向COL1A1基因的shRNA对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖与凋亡的影响

目的：探讨抑制Ⅰ型胶原α1链（COL1A1）基因表达对人乳腺癌MDA—MB-231细胞增殖及凋亡的影响。方法：用已构建的pSilencer2．1-U6-COL1A1重组质粒转染乳腺癌细胞MDA—MB-231，采用RT—PCR和Western blotting技术检测重组质粒对COL1A1基因表达的影响，MTT比色法测定细胞增殖的抑制情况，流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡的变化，Hoechst33258荧光染色观察细胞凋亡的形态学变化。结果：RT—PCR及Western blotting结果证实重组质粒在mRNA和蛋白水平分别显著抑制COL1A1基因表达；pshRNA—COL1A1转染组细胞的增殖速度明显减慢且呈时间依赖关系；与对照组相比，pshRNA—COL1A1组细胞明显阻滞于G0／G1期，细胞凋亡率显著升高（P〈0．05），出现细胞质浓缩、核凝聚等凋亡形态学变化。结论：pshRNA—COL1A1能有效抑制乳腺癌MDA—MB-231细胞增殖，并诱导其凋亡，为以COL1A1为靶点的乳腺癌基因治疗提供实验依据。