Epidemiologia molecular dos vírus dengue em Goiânia-GO, 1994- 2006: vigilância laboratorial e caracterização dos sorotipos circulares

Atualmente, a dengue representa um dos maiores problemas em saude publica, pois e causa de doenca e morte entre milhares de pessoas que residem nas regioes tropicais e subtropicais do mundo. Os virus dengue existem como quatro sorotipos virais (DENV-1 a DENV-4) de acordo com diferencas antigenicas, sendo caracterizados grupos intra-tipicos denominados genotipos. A vigilância laboratorial possibilita a confirmacao diagnostica de infeccao por dengue e o monitoramento de sorotipos circulantes, atraves de tecnicas diagnosticas de rotina. Recentemente, o uso de tecnicas moleculares tem contribuido para a caracterizacao e monitoramento de genotipos potencialmente virulentos na vigencia de epidemias e melhor entendimento da biologia do virus. Esta tese de doutorado compreende uma introducao que contempla uma revisao da literatura sobre dengue e dois manuscritos que descrevem as pesquisas realizadas com enfoque no diagnostico laboratorial e epidemiologia molecular. O primeiro manuscrito intitulado Laboratorial Surveillance of Dengue Virus in Central-Brazil, 1994-2003, foi publicado no Journal of Clinical Virology, 2006 37 (3): 179-83. Neste estudo, apresentamos os resultados de uma vigilância laboratorial conduzida na cidade de Goiânia na regiao Centro-Oeste do Brasil, desde a introducao dos virus dengue em 1994 ate 2003. Casos com suspeita clinica de dengue foram atendidos em unidades de saude e hospitais de referencia da regiao metropolitana e os testes sorologicos e/ou isolamento viral realizados no laboratorio de referencia estadual LACEN-GO. Nosso objetivo foi descrever sobre os sorotipos virais circulantes de dengue nos anos de 1994 a 2003 e o seu papel nos desfechos clinicos de dengue na regiao Centro-Oeste do Brasil e caracterizar sorotipos e genotipos ou subtipos genomicos pela RT-PCR e RSS-PCR em amostras selecionadas. O sorotipo DENV-1 foi identificado como prevalente nos anos 1994 a 2002, sendo substituido por DENV-3 em 2003. Os adultos (87,4%) foram mais atingidos e a dengue classica a mais diagnosticada. A dengue foi confirmada em 50% dos casos suspeitos de dengue incrementado pela RT-PCR. Os genotipos ou subtipos genomicos do DENV-1 e DENV-3 corresponderam circulantes no pais. A infeccao pelo DENV-3 nao sugere um papel relevante no aumento da gravidade da doenca durante seu primeiro ano de dispersao no Centro-Oeste do Brasil. O segundo manuscrito, a ser submetido a publicacao, foi intitulado Epidemiologia Molecular do Virus Dengue tipo 3 em Goiânia GO, 2005-2006. O objetivo desse trabalho foi caracterizar o genotipo circulante do DENV-3 isolado de amostras bem caracterizadas clinica e laboratorialmente em Goiânia-GO/Brasil e analisar as alteracoes genomicas encontradas. Sete sequencias regioes prM/M/E, foram obtidas e analisadas em comparacao com cepas prototipo do DENV-3. As sequencias do estudo apresentaram maior homologia com a cepas do genotipo III. O percentual de identidade nucleotidica das amostras do DENV-3 sequenciadas variou de 97,0% a 99,6% e de aminoacidos 97,5% a 99,5%, mostrando-se conservadas. A analise da sequencia nucleotidica das amostras do estudo revelou mutacoes silenciosas e 14 substituicoes de aminoacidos na sequencia da proteina deduzida do gene prM/M/E. Em conclusao, o estudo confirma que as cepas de DENV-3 da regiao centrooeste pertencem ao genotipo III. Alteracoes genomicas significativas foram observadas ao longo do dominio III da proteina E, as quais poderiam afetar a patogenicidade, entretanto nao foram consistentes entre as amostras de DCC e FHD. As amostras de pacientes com dengue classica apresentaram alteracoes em residuos de aminoacidos no dominio III relatados como pontos de atenuacao viral. Maiores investigacoes serao necessarias para confirmar as alteracoes encontradas e sua relacao com as formas clinicas.