Ein Beitrag zur Reindarstellung des Psittakose‐Virus durch Behandlung mit Trypsin

Zusammenfassung Es wird ein Verfahren zur Reinigung des Psittakose - Virus beschrieben, das einwandfreie elektronenmikroskopische Bilder ermoglicht. Die im Unter-suchungsmaterial (infektiose Eiflussigkeiten) vorhandenen groben Beimengungen wurden durch niedertourige Zentrifugation (3 Minuten lang bei 2000 U/min) entfernt, die Uberstande mehrmals bei 4200 g gewaschen und die so gewonnenen Sedimente mit Trypsin 3 Stunden lang bei 40° C behandelt. Nach erneutem mehrmaligem Waschen war der fur optische Untersuchungen erforderliche Reinigungsgrad erreicht. An den Viren konnten morphologische Veranderungen, die durch die Art der Behandlung bedingt sein konnten, nicht festgestellt werden. Fur die wertvolle Hilfe beim Arbeiten am Elektronenmikroskop und fur die photographische Arbeit danken wir der technischen Assistentin Frl. Inge-Marie Schultze verbindlichst. Summary Studies on the purification of the psittacosis virus with trypsin A method was described of purifying Psittacosis virus for use in the electronmicroscope. The material to be examined (fluid from infected eggs) was centrifuged at low speed (3 minutes at 2000 rpm). The supernatant was washed several times at 4200 g. The resulting precipitate was treated with trypsin for 3 hours at 40° C. After several additional washings the preparation was ready for use. Specimens prepared by this method were found to be free from undesirable background contaminations. No alterations due to this treatment could be detected in the virus. Resume Recherches sur la purification par la trypsine du virus de la psittacose Les auteurs decrivent un procede de purification du virus de la psittacose, permettant une microscopie electronique impeccable. Les impuretes grossieres contenues dans le materiel d'examen (liquides infectieux de l'oeuf) sont enleves par une centrifugation de 3 minutes a 2000 tours/mn. Les suspensions restantes sont lavees plusieurs fois a 4200 g et le sediment est traite a la trypsine pendant trois heures a 40°C. Apres plusieurs lavages successifs on obtient le degre de purification necessaire pour les examens optiques. On ne put constater aucune modification morphologique du virus qui puisse etre imputee au procede de purification. Resumen Contribucion al aislamiento al estado puro de virus de la psittacosis mediante el tratamiento con tripsina Se describe una tecnica para purificar el virus de la psitacosis, permitiendo la obtencion de imagenes perfectas a traves del microscopio electronico. Las impurezas mas groseras presentes en el material analizado (liquidos infecciosos del huevo) se separaron mediante la centrifugacion a poco velocidad (durante tres minutos a 2.000 r.p.m.), el liquido sobrenadante se lavo varias veces con 4.200 g, y los sedimentos asi obtenidos se trataron entonces con tripsina durante 3 horas a 40°C. Despues de lavar nuevamente repetidas veces, se habia logrado el grado de pureza precisado para las investigaciones opticas. En los virus no se pudieron comprobar alteraciones morfologicas que pudieran estar condicionades por este tipo de tratamiento.