131I-FIAU／TK报告基因系统监测大鼠脑梗死模型中移植细胞的研究

目的检测经不同途径移植骨髓间充质干细胞后大鼠脑梗死模型中131I一氟一碘阿糖呋喃基尿嘧啶（FIAU）的生物分布及脑组织中胸苷激酶（TK）基因的表达，为核素报告基因显像无创性监测细胞移植治疗脑梗死提供实验依据。方法制备携带TK一内部核糖体连接位点一脑源性神经生长因子（IRES—BDNF）基因的腺病毒重组体Ad5一TK—IRES—BDNF一增强型绿色荧光蛋白（EGFP）；线栓法制作大鼠脑梗死模型；将转基因的干细胞分别通过脑实质、侧脑室、颈动脉和尾静脉注射人大鼠脑梗死模型中，以正常大鼠为对照组；Iodogen固相氧化法标记氟·阿糖呋喃基尿嘧啶（FAU）后进行生物分布研究，计算％ID／g；采用实时定量PCR和Westernblot定量分析TK基因的表达；数据分析采用独立样本t检验、单因素方差分析及Pearson相关分析。结果原位移植组梗死侧脑组织中的％ID／g为0．124±0．013，明显高于侧脑室移植组（0．052±0．004）、颈动脉移植组（0．061±0．002）、尾静脉移植组（0．059±0．005）和对照组（0．005±0．001），差异有统计学意义（t=2．913～5．652，P均〈0．05），其他移植细胞组组间差异无统计学意义（￡=0．694—1．448，P均〉0．05）。所有移植细胞组内两侧脑组织％ID／g的差异有统计学意义（f=9．004～15．734，P均〈0．05），而对照组两侧间差异无统计学意义（t=1．511，P=0．182）。此外，原位移植组梗死侧脑组织中TK基因的表达高于其他各组，差异有统计学意义（t=7．482～12．371，P均〈0．05）；且脑组织TK基因表达的相对量与％ID／g呈正相关（r=0．971，P〈0．001）；脑组织内TK／[3一actin的比值与％ID／g呈正相关（r=0．899，P：0．002）。结论原位注射是治疗脑梗死的最佳细胞移植途径；选择适当示踪剂，可利用PET或SPECT进行无创性活体监测细胞移植治疗脑梗死�