Quantificação da angiogênese induzida por tumor em membrana corioalantóica de embrião de galinha = Quantification of tumor-induced angiogenesis on chicken embryo chorioallantoic membrane

Angiogenese e um processo de surgimento de novos microvasos provenientes de vasos sanguineos ja existentes. O desenvolvimento tumoral e o processo de metastase sao dependentes de angiogenese, pois o tumor em crescimento necessita de uma rede capilar que forneca nutrientes e oxigenio. A membrana corioalantoica de embriao de galinha (CAM) e um modelo experimental in vivo que oferece muitas vantagens, como a alta vascularizacao natural e alta taxa de reproducao, alem de ser um modelo simples e de baixo custo. A CAM e composta por proteinas de matriz extracelular, que mimetizam o ambiente fisiologico de celulas cancerosas. A etapa de contagem do numero total de vasos permite a determinacao dos efeitos dos estimulos pro ou anti angiogenicos, portanto a padronizacao de um metodo eficaz e necessario. O presente estudo teve como objetivo geral avaliar o potencial angiogenico de celulas de uma linhagem de adenocarcinoma de colon humano (HT29) e propor um metodo para quantificacao da angiogenese induzida por celulas tumorais na CAM. Os embrioes foram mantidos em sistema ex ovo . No oitavo dia, foram adicionados sobre a CAM, implantes de colageno contendo celulas tumorais em diferentes concentracoes. No decimo primeiro dia foi feito o registro fotografico utilizando microscopio estereoscopico e foram determinados quatro scores para a quantificacao e caracterizacao dos vasos, considerando-se se seccionavam o implante e tambem seu grau de ramificacao. A contagem dos vasos, feita em uma area especifica ao redor do implante, foi realizada apos edicao das imagens pelo programa Image Pro Plus. Os resultados mostraram aumento significativo do numero de vasos que nao seccionavam o implante para aqueles contendo 3 x 10 4 e 6 x 10 4 celulas. Pode-se concluir que a metodologia de contagem dos vasos, utilizando registros fotograficos e edicoes de imagens, e eficaz. Demonstrou-se que as celulas HT29 induzem a uma alteracao no padrao de crescimento de novos vasos quando depositada sobre a CAM em implantes de colageno e podem ser utilizadas como modelo experimental para se investigar o efeito de diferentes compostos sobre a angiogenese induzida por tumor.