禽流感病毒（H5N1）血凝素蛋白真核表达载体的构建与表达

目的：构建禽流感病毒（H5N1）血凝素蛋白HA真核表达载体并表达其编码蛋白（转染293T细胞）。方法：从江苏H5N1流感病毒毒株（A／Jiangsu／07—4（H5N1））提取病毒RNA，采用RT—PCR技术扩增HA全长基因，将其克隆至pMDl8-TVector中构建pMDl8-T．HA质粒，双酶切pMDl8-T-HA与PXJ40-MYC后，构建真核表达载体PXJ40-MYC—HA，经酶切及测序鉴定后将质粒转染到293T细胞中，通过West—elTlblot鉴定HA蛋白的表达。结果：经双酶切、测序鉴定证实HA基因的真核表达载体构建成功。Westernblot法可见HA基因编码蛋白的成功表达。结论：成功构建了H5N1血凝素真核表达载体，该表达载体的构建为后期建立稳定表达HA蛋白的细胞模型和HA蛋白功能研究奠定了基础。