丹参酮IIA增强HSV-tk／GCV旁观者效应及其与Cx43 mRNA表达的关系

目的研究丹参酮ⅡA(TanshinoneⅡA,Tan)对HSV-tk/GCV旁观者效应的增强作用及其与间隙连接蛋白Cx43转录表达的关系.方法应用polybrene转染、荧光定量RT-PCR等技术,观察Tan对宫颈癌细胞ME180(ME)、ME/TK转化细胞旁观者效应及诱导Cx43 mRNA表达的作用.结果在HSV-tk/GCV系统中,Tan显著地提高了ME/TK细胞对GCV的敏感性.在2μg/ml GCV作用下,以1.3 × 109 moL/L Tan与不加Tan的作用相比较,在ME与ME/TK不同比例混合细胞的各组中,细胞的存活率明显降低,差异均有显著性(P＜0.05).并观察到Tan对GCV旁观者效应的增强作用,在一定范围内为1.3×10-8 moL/L和1.3×10-9mol/L.RT-PCR结果表明,经1.3×10-8 mol/L和1.3×10-9mol/L Tan处理的ME细胞,其Cx43 mRNA的相对拷贝数比值增高约8.83倍及8.47倍.结论在宫颈癌ME180细胞中,Tan在1.3×10-8mol/L和1.3×10-9mol/L范围内具有明显增强HSV-tk/GCV旁观者效应的作用.Tan在转录水平诱导Cx43 mRNA表达上调,与旁观者效应的增强作用密切相关.