应用快速分离色谱-串联质谱（RRLC—QQQ）定量分析脑缺血后脑组织中内源性氨基酸的含量

目的：基于RRLC—QQQ建立脑缺血后脑组织中未衍牛化的内源性氨基酸的含量测定方法。方法：采用Diamonsil C18（4．6mm×250mm，5μm）色谱柱，15min内同时测定12种氨基酸。乙腈-0．1％甲酸水梯度洗脱，流速为0．5mL·min^-1离子源为ESI，正离子扫描模式，扫描方式为多反应检测。结果：各氨基酸标准曲线在检测范围内均呈良好线性（r〉0．996），其检测限低于1．53μg·L^-1，定量限低于3．09μg·L^-1，高中低3个浓度水平日内和日间精密度的RSD均小于11％。结论：实际样品测定结果表明与假手术组相比，存脑缺血病理状态下，除N-乙酰天门冬氨酸外，脑组织中其余氨基酸水平均升高。部分氨基酸有显著变化，变化水平在术后12，24h呈时间依赖性。该方法简便，快速，灵敏。这种方法可以应用于寻找脑缺血生物代代谢标记物，探索研究脑缺血工分子机制以及中药多成分组合药物协同作用机制。