Comparative evaluation of freeze-dried and liquid antigens in the direct agglutination test for serodiagnosis of visceral leishmaniasis (ITMA-DAT/VL).

Summary Objective  The direct agglutination test (DAT) for visceral leishmaniasis (VL) with liquid (LQ) antigen is known to be only moderately reproducible because of inter-observer and batch-to-batch variability as well as its sensitivity to temperature and shaking during transport. We evaluated a DAT with freeze-dried (FD) antigen and compared it with the LQ antigen version. Methods  Blood samples of clinical VL suspects and healthy endemic controls were collected in Sudan, Nepal and India. Both test versions were performed in duplicate in the respective countries and in the reference laboratory. Interbatch variability and stability tests were conducted and agreement was examined within and between centres on a dichotomic scale by Cohen's kappa as well as on a continuous scale through Bland–Altman plots. Results  The FD antigen remains fully active even after storage at 45 °C for 24 months. Using a cut-off titre of 1 : 6400, the agreement between the FD and the LQ formats was excellent. Conclusion  The major advantages of FD antigen are its better stability at higher temperatures and its longer shelf life, which make it much more suitable than the LQ version for use in the field. Objectif  Le test d'agglutination directe base sur l'antigene liquide (LQ DAT) pour la leishmaniose viscerale (LV) est connu pour etre moderement reproductible a cause de la variabilite inter observateur et de lots a lots, ainsi qu'une sensibilitea la temperature et a l'agitation lors du transport. Nous avons mene une evaluation detaillee d'une version lyophilisee du test (FD DAT) et les concordances avec le test (LQ DAT). Methode  Des echantillons cliniques de sang suspects LV et de controles sains de milieu endemique ont ete collectes au Soudan, au Nepal et en Inde. Les tests FD DAT et LQ DAT ont ete appliques en duplicats dans les pays d'origine et dans le laboratoire de reference. Des tests sur la variabilite inter lots et sur la stabilite ont ete menes et les concordances ont ete analysees au sein des sites et entre eux, sur une echelle dichotomique de la valeur du Kappa de Cohen ainsi que sur une echelle continue par le diagramme de Bland–Altman. Resultats  L'antigene lyophilise demeure encore totalement actif meme une conservation a 45 °C pendant 24 mois. Une excellente concordance entre la version lyophilisee et la version liquide du test a ete obtenue pour un titre seuil fixea 1/6400. Conclusion  L'avantage principal de l'antigene lyophilise est sa stabilite meilleure a des temperatures plus elevees et sa plus longue duree de vie, qui la rendent plus appropriee que la version liquide pour une utilisation sur le terrain. Objetivo  Se sabe que la Prueba de Aglutinacion Directa (PAD) para la Leishmaniasis Visceral (LV) con antigeno liquido (PAD ALQ) es solo moderadamente reproducible debido a la variacion inter-observador y a la variablidad entre lotes, asi como por lo sensible que es a la temperatura y a la agitacion durante el transporte. Hemos conducido una evaluacion exhaustiva de una version de la PAD con antigeno liofilizado (PAD ALF) y su concordancia con PAD ALQ. Metodo  Se recogieron muestras de sangre de pacientes con sospecha clinica de LV y de controles sanos de areas endemicas, en Sudan, Nepal e India. Tanto la PAD ALF como la PAD ALQ fueron realizadas por duplicado en los paises respectivos y en un laboratorio de referencia. Se miraron la variabilidad entre lotes, las pruebas de estabilidad y la concordancia entre y dentro de los centros en una escala dicotomica utilizando la kappa de Cohen, asi como en una escala continua mediante graficos de Bland–Altman. Resultados  El antigeno congelado estaba totalmente activo incluso despues de guardarlo a 45 °C durante 24 meses. Utilizando como corte un titulo de 1 : 6400, la concordancia entre el antigeno congelado y el antigeno liquido fue excelente. Conclusion  La principal ventaja del antigeno liofilizado es su mayor estabilidad a temperaturas mas altas y una vida media mas larga, que lo hace mucho mas apropiado que la version liquida para su uso en el campo.