Caracterização de frutos nativos da região amazônica e desenvolvimento de um biossensor amperométrico para determinação da capacidade antioxidante

O consumo de frutos tem sido incentivado nao apenas por estes fornecerem nutrientes essenciais ao organismo humano, mas por serem fontes naturais em compostos bioativos que promovem beneficios a saude e reduzem o risco de desenvolver doencas cronicas nao transmissiveis. Considerando que a Amazonia brasileira possui uma imensa diversidade frutifera, mas escassas informacoes sobre suas propriedades nutricionais, antioxidantes e bioativas, este trabalho teve por objetivo caracterizar dez frutos nativos da regiao amazonica. A caracterizacao deu-se, inicialmente, por analises bromatologicas convencionais, seguidas da determinacao dos minerais Ca, Cu, Fe, Li, Mg, Mn, Na e Zn por Espectrometria de Emissao Optica com Plasma Indutivamente Acoplado (ICP OES). Depois, seguiu-se a determinacao da capacidade antioxidante dos frutos, empregando diferentes metodos colorimetricos (DPPH, ABTS e NBT), a avaliacao da atividade antiproliferativa contra a linhagem celular de câncer de colon humano (caco-2), a determinacao de compostos bioativos (vitamina C e compostos fenolicos totais), e a caracterizacao da composicao em compostos fenolicos, utilizando um sistema de Cromatografia a Liquido de Ultra Eficiencia (CLUE) acoplado a espectrometria de massas de alta resolucao. Considerando as desvantagens dos metodos convencionais para determinacao da capacidade antioxidante, este trabalho objetivou ainda desenvolver um biossensor amperometrico utilizando como transdutor um sistema convencional de tres eletrodos impressos em tela de PVC, contendo azul da Prussia (PB) como mediador eletroquimico. Inicialmente procedeu-se a otimizacao das condicoes de biofuncionalizacao da enzima xantina oxidase (XOD) com relacao a razao XOD:PVA-AWP, ao tempo de irradiacao sob a luz de neonio e a quantidade de XOD empregada em cada sensor. Depois, avaliou-se o desempenho analitico do biossensor, e finalmente procedeu-se a determinacao da capacidade antioxidante de uma substância pura padrao e de extratos de frutos. Os resultados da caracterizacao bromatologica evidenciaram maiores conteudos em lipideos, proteinas e energia nas amostras de buriti, monguba e uxi. As amostras de abiu, acai, bacuri, buriti, inaja, monguba, pajura e uxi mostraram-se com elevado teor e/ou fonte em um ou mais minerais. Nas polpas de biriba e bacuri, observou-se elevada capacidade antioxidante lipofilica contra diferentes radicais livres, enquanto que os frutos de abiu, inaja e monguba apresentaram maior capacidade antioxidante hidrofilica. A atividade antiproliferativa dos frutos de biriba, inaja, monguba e pajura levaram a uma inibicao significativa no crescimento celular da linhagem de caco-2. A maioria das polpas se mostraram alimentos de alto teor em vitamina C, enquanto que os frutos biriba e pajura foram classificados como fontes. Foram observadas maiores concentracoes de compostos fenolicos lipofilicos na polpa de bacuri, enquanto que nas amostras de abiu, bacuri, inaja e monguba foram verificados maiores conteudos fenolicos hidrofilicos. A avaliacao da composicao fenolica cromatografica nos extratos de biriba, inaja e monguba quantificou um total de 11, 25 e 21 compostos, respectivamente, com atividades biologicas importantes. Os resultados fornecem informacoes que poderao contribuir para o melhor conhecimento da biodiversidade, bem como para o desenvolvimento da biotecnologia com vista a conservacao do bioma Amazonico. No que concerne ao biossensor desenvolvido, as condicoes operacionais otimizadas foram: XOD:PVA-AWP de 1:2 v/v; tempo de exposicao a luz de neonio de 30 min, e carga enzimatica de 8 mU por eletrodo. O biossensor apresentou-se estavel, com respostas rapidas, de facil manuseio, de relativo baixo custo, elevada sensibilidade, baixos limites de deteccao e de quantificacao. A aplicabilidade do biossensor foi demonstrada pela analise in vitro do acido galico, tomado como antioxidante padrao, bem como de frutos amazonicos e nao autoctones.