酿酒酵母β-葡聚糖通过膜受体Dectin-1和TLR-2诱导绵羊瘤胃上皮细胞表达SBD-1的机制研究

为了探索酿酒酵母β-葡聚糖诱导绵羊瘤胃上皮细胞（ovine ruminal epithelial cells，ORECs）β-防御素-1（sheep β-defensin-1，SBD-1）表达过程中膜受体Dectin-1和TLR-2可能存在的作用。本研究首先利用免疫组化、RT-PCR、免疫荧光和Western blot等方法检测Dectin-1是否在ORECs内表达，并且采用qPCR和Western blot方法对β-葡聚糖刺激ORECs后细胞膜受体Dectin-1和TLR-2的表达变化进行检测。而后用不同浓度的Dectin-1阻断剂昆布多糖或TLR-2特异性封闭抗体分别预处理ORECs后，采用qPCR和ELISA方法检测SBD-1的表达变化，以确定β-葡聚糖诱导SBD-1表达过程中Dectin-1和TLR-2的参与情况。结果显示：1）绵羊瘤胃组织及ORECs内存在Dectin-1表达，且β-葡聚糖刺激ORECs后Dectin-1和TLR-2的表达水平显著增加（P < 0.05）；2）不同浓度的昆布多糖和TLR-2封闭抗体均可以极显著降低β-葡聚糖诱导SBD-1的表达（P < 0.01），且随着阻断剂和封闭抗体浓度的增加，其抑制SBD-1表达的作用越明显。结果表明，Dectin-1在绵羊瘤胃组织及ORECs内均表达，并且酿酒酵母β-葡聚糖在ORECs中诱导SBD-1的表达是由Dectin-1和TLR-2介导产生的。