Analysis of low density lipoprotein receptor function and gene mutation in familial hypercholesterolemic patients

目的分析家族性高胆固醇血症 (familial hypercholesterolemia,FH) 患者低密度脂蛋白受体(low density lipoprotein receptor,LDLR)的功能改变及基因突变.方法分离FH患者外周血淋巴细胞,用流式细胞仪观察淋巴细胞结合和摄取荧光标记的低密度脂蛋白的情况.抽提FH患者外周血基因组DNA为模板,进行聚合酶链反应-单链构象多态性分析(polymerase chain reaction-single strand conformation polymorphism, PCR-SSCP)及DNA序列分析.结果对一家两例临床诊断为FH纯合子的患儿及其父母的外周血淋巴细胞LDLR功能进行了分析,发现均表现为低密度脂蛋白(LDL)摄取和结合障碍.进一步从基因水平进行了研究,发现LDLR基因突变是位于第6外显子编码第297位氨基酸的碱基发生缺失,导致移码突变并使得终止密码子TGA在第369位提前出现,从而不能表达正常的LDLR,体内胆固醇的代谢发生障碍.结论对1例家族性高胆固醇血症纯合子家系应用流式细胞仪方法初步发现LDLR功能缺陷,进一步结合PCR-SSCP方法证实其LDLR存在新的突变类型.