Proliferation and differentiation of superparamagnetic iron oxide and enhanced fluorescence protein double labeled neurotrophin 3 gene modified midbrain derived neural stem cells

目的 建立超顺磁氧化铁(superparamagnetic iron oxide,SPIO)、绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)双标神经营养素3(neurotrophin 3,NT-3)基因修饰中脑神经干细胞.方法 以质粒pcDNA3-NT3、pGFPN1共转染第三代E14大鼠胚胎中脑神经干细胞并用SPIO标记.荧光显微镜检测GFP的表达;免疫细胞化学、western blot鉴定NT-3的表达;普鲁士蓝染色、透射电镜鉴定SPIO标记.结果 GFP在基因转染12 h后开始表达;免疫细胞化学、western blot表明细胞能正确表达NT-3;普鲁士蓝染色显示细胞标记率达100%,透射电镜显示SPIO颗粒位于吞饮小泡和胞浆内.结论 建立SPIO、GFP双标NT-3基因修饰中脑神经干细胞,为进一步开展帕金森病的细胞移植治疗研究奠定基础。