Purificación de cinco isoformas de la hormona luteinizante bovina (bLH). Caracterización fisicoquímica, biológica e inmunológica

EL ESTUDIO DESCRIBE LA PURIFICACION DE CINCO ISOFORMAS DE LH A PARTIR DEL EXTRACTO HIPOFI SARIO BOVINO. LAS FRACCIONES OBTENIDAS A PH 6.8 Y A PH 9.5 DE LA CROMATOGRAFIA DE INTERCAMBIO CATIONICO, SE REPURIFICARON EN CONDICIONES IDENTICAS EN DEAE-SEPHACEL PARA OBTENER A LA LH-I (1.2 MG/KG DE HIPOFI SIS) Y LAS LH- II (1.8 MG/KG), LH-III (1.5 MG/KG) LH-IV (1.2 MG/KG) Y LH-V (7.0 MG/KG), RESPECTIVAMENTE. LA MOVILIDAD RELATIVA (RF) DE CADA ISOFORMA SE DETERMINO POR UNA ELECTROFORESIS EN GELES DE POLIACRILAMIDA. LA LH-I PRESENTO UN RF DE 0.16 CM; LAS LH-II, III Y IV DE 0.044 CM Y LA LH-V DE 0.11CM. EL PESO MOLECULAR (PM) DE LAS LH-I Y LH-V CORRESPONDIO A 37.5 KILODALTONES (KDA), Y DE 38.5 KDA PARA LA LH-II, LH-III Y LH-IV. EL ANALISIS POR INMUNOTRANSFERENCIA IDENTIFI CO BANDAS DE PM DE 59.0, 37.5 Y 22.0 KDA EN LOS ESTANDARES COMO EN LAS ISOFORMAS. LA POTENCIA BIOLOGICA IN VIVO CORRESPONDIO A 1.04 U/MG (LH-I); 5.9 U/MG (LH-II), 0.16 U/MG (LH-III), 0.86 U/MG (LH-IV) Y 1.4 U/MG (LH-V) Y LA CONCENTRACION DE LH POR RADIOINMUNOENSAYO (RIA) A LA DOSIS ED50 FUE DE 2.27 NG/TUBO (LH-I), 1.19 NG/TUBO (LH-II), 1.35 NG/TUBO (LH-III), 0.66 NG/TUBO (LH-IV) Y 1.71 NG/TUBO (LH-V). LOS DATOS MUESTRAN LA OBTENCION DE DOS ISOFORMAS DE ELUCION A PH 6.8 (I Y V) Y TRES ISOFORMAS A PH 9.5 (II, III Y IV), CON HETEROGENEIDAD DE CARGA, DIFERENTE ACTIVIDAD BIOLOGICA Y CONCENTRACION INMUNORREACTIVA DE LH EN UN SISTEMA ESTANDAR, CON RENDIMIENTOS SUPERIORES PARA INTENTAR EL DESARROLLO DE SISTEMAS ANALITICOS MAS PRECISOS.