Primer Spanner:一个高效的定点突变PCR引物设计在线工具

基于PCR的实验策略在生物工程研究中具有广泛应用，如定点突变（site-directed mutagenesis，SDM），DNA拼接和载体构建。引物设计是这类实验技术中的关键一环，因其直接影响扩增效率和PCR产物的拼合。在嵌合式引物设计方法（一对突变引物在5’端具有互补序列）的基础上，开发了一个在线工具PrimerSpanner（PS），可简单高效获得设计定点突变引物。PS可应用于单碱基或连续多碱基替换、插入、敲除等突变形式。通过大量突变实验与测序验证，结果表明该工具设计的引物进行的定点突变效果良好。