四氧嘧啶对人神经瘤SK-N-SH细胞增殖、凋亡的影响及机制探讨

目的观察四氧嘧啶对人神经瘤sK—N—SH细胞增殖和凋亡的影响，并探讨其机制。方法将人神经瘤sK—N．SH细胞分为两组，对照组常规培养12h，观察组分别加不同浓度的四氧嘧啶培养12h。用MTI＇法测细胞吸光度值观察细胞增殖情况，用PI／Hoechst染色法观察细胞凋亡，用蛋白免疫印迹法检测细胞中糖基化和磷酸化的神经丝蛋白。结果对照组细胞吸光度值为0．43±0．01，观察组加入2、4、6、8、10mM四氧嘧啶作用12h，细胞吸光度值分别为0．39-1-0．01、0．35±0．02、0．30±0．01、0．26±0．03、0．21±0．02；观察组与对照组比较，P均〈0．05；观察组不同浓度间比较，P均〈0．05。对照组细胞凋亡率为5％±1％，观察组加入2、4、6mM四氧嘧啶作用12h，细胞凋亡率分别为10％±1％、18％±2％、29％±1％；观察组与对照组比较，P均〈0．05；观察组不同浓度间比较，P均〈0．05。对照组细胞中磷酸化、糖基化神经丝蛋白OD值为1．00±0．20、1．00±0．20，观察组加入2、4、6mM四氧嘧啶作用12h，细胞中磷酸化、糖基化神经丝蛋白OD值分别为1．21±0．42和0．95±0．21、1．32±0．51和0．78±0．32、1．5l±0．30和0．75±0．24；观察组与对照组比较，P均〈0．05；观察组不同浓度间比较，P均〈0．05。结论四氧嘧啶可抑制SK—N—SH细胞增殖，并诱导其凋亡；可能与神经丝蛋白的糖基化降低、磷酸化增加有关。