Biossensores Enzimáticos para Detecção e Quantificação de Carbamatos em Amostras de Alimentos.

Este trabalho contempla tres estrategias para o biossensoriamento de pesticidas da classe dos carbamatos (CBM) em alimentos naturais, utilizando biossensores a base de polifenoloxidases como dispositivos analiticos: (i) eletrodo de pasta de nanotubos de carbono (EPNC) modificado com lacase de Tramites versicolor (LAC) por entrapment da enzima diretamente no material composito, definido como LAC-EPNC; (ii) eletrodo de pasta de grafeno (EPG) modificado com filmes de Azul da Prussia (AP), seguido da imobilizacao de LAC por drop coating, definido como LAC/AP/EPG; e (iii) EPG modificado por eletrodeposicao de filme hibrido composto por quitosana (CS), nanoparticulas de ouro (NpAu) e mistura das enzimas LAC e tirosinase de Agaricus bisporus (TIR), definido como LAC-TIR-NpAu-CS/EPG. Tomado por base o processo redox do substrato 4-aminofenol (4-AMF), a presenca dos nanotubos de carbono e do grafeno proporcionou uma serie de vantagens aos dispositivos, a saber: aumento nos valores de corrente de pico, catalise do processo redox, melhoria na reversibilidade e, consequentemente, na cinetica de transferencia eletronica. Filmes de AP (imobilizacao direta da enzima sem a necessidade de regente para cross-linking), CS (biocompatibilidade adequada, maior imobilizacao e fixacao das enzimas) e NpAu (reducao da resistencia a transferencia de carga) tambem apresentaram importante papel na configuracao eletrodica dos biossensores. As curvas analiticas foram construidas por voltametria de onda quadrada, baseando-se na capacidade dos CBM (carbofurano, carbaril, formetanato, pirimicarbe, propoxur e ziram) de inibir a atividade das polifenoloxidases. Em geral, os procedimentos propostos apresentaram sensibilidade (limites de deteccao variando de 0,001 a 0,093 mg kg-1) que contempla os limites maximos estabelecidos pelas agencias de seguranca e controle alimentar brasileira e europeia para residuos de CBM em hortalicas (tomate, alface e batata) e frutas citricas (laranja, tangerina e limao), com baixo nivel de interferentes. Os ensaios de recuperacao foram realizados em extratos QuEChERS das amostras, com porcentagens de recuperacao variando de 91,0 ± 0,1% a 101,10 ± 0,1%; para contaminacoes de 0,01 a 3,14 mg kg-1. Portanto, LAC-EPNC, LAC/AP/EPG e LAC-TIR-NpAu-CS/EPG podem ser ferramentas promissoras na analise de CBM em matrizes alimentares.