小鼠干扰素应答基因（Ifrg15）的克隆、原核表达及其融合蛋白的亲和纯化

为研究一个可能的干扰素应答基因（interferon responsive gene15,Ifrg15）所编码蛋白质的生物学功能,对昆明小鼠（Mus musculus）基因组DNA进行PCR扩增获得Ifrg15（393bp）,并将其克隆到pGEM-T载体,经测序鉴定后用EcoRⅠ和XhoⅠ酶切下Ifrg15基因片段并和双酶切后的表达载体pET-41（c）进行连接,然后转化入大肠杆菌（Escherichia coli）BL21（DE3）感受态细胞。对重组克隆用IPTG诱导融合蛋白的表达,并进行分离纯化。结果表明,本实验在E.coliBL21（DE3）菌株中成功地高效表达、并在变性亲和层析条件下成功纯化了GST＆6xHis-Ifrg15融合蛋白。