EVALUACIÓN DE CULTIVO CELULAR EN DISPOSITIVOS DE MICROFLUÍDICA PARA SU APLICACIÓN EN LA PRODUCCIÓN DE ANTICUERPOS MONOCLONALES
2016
Los dispositivos de microfluidica aplicados al cultivo celular permiten crecer celulas bajo condicionescontroladas apropiadas para la produccion de proteinas recombinantes. Con el proposito de dilucidar lascondiciones optimas para el cultivo de celulas capaces de expresar proteinas recombinantes en losmicrodispositivos se cultivaron celulas HEK-293T bajo diferentes condiciones experimentales. Las celulasse cultivaron en dispositivos de polimetilmetacrilato (PMMA) y polidimetilsiloxano (PDMS) en presencia oausencia del agente de adhesion celular poli-D-lisina. Se evaluaron diferentes geometrias y espesores asicomo tambien la influencia del flujo sobre el crecimiento y adhesion celular[1]. Los resultados muestran quela presencia de poli-D-lisina mejora la adhesion y viabilidad de las celulas tanto en flujo continuo comodiscontinuo[2]. Adicionalmente, la adhesion optima de las celulas fue observada en las esquinas de losmicrocanales, asi como tambien en los canales anchos y las cisternas posiblemente debido a la disminucionen el estres hidrodinamico en estas areas. Los microdispositivos con diseno de cisternas se utilizaron comomodelo para estudiar la distribucion de celulas infectadas con pseudovirus del virus de la estomatitisvesicular (VSV por sus siglas en ingles “vesicular stomatitis virus”) a traves de la expresion de la proteinafluorescente verde (GFP por sus siglas en ingles “green fluorescent protein”). Estos resultados proveeninformacion para la optimizacion de la arquitectura de los microcanales para cultivos de celulas adherentesa largo plazo que permitan utilizar los microdispositivos como bioreactores para la produccion deanticuerpos monoclonales terapeuticos y la actividad biologica in vitro de farmacos.
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