检测艰难梭菌耐莫西沙星 gyrA 基因点突变的双重荧光PCR方法的建立和评价

目的  建立一种检测艰难梭菌耐莫西沙星gyrA基因点突变的双重荧光PCR方法。 方法  设计针对艰难梭菌gyrA基因的特异性引物，并针对莫西沙星耐药株和敏感株的gyrA基因突变位点设计不同的TaqMan-MGB探针，优化可同时检测ATT、ACT突变点的双重荧光定量PCR方法，验证该方法的灵敏性、特异性和重复性，并进行应用评价。 结果  该方法对莫西沙星耐药株和敏感株gyrA基因突变位点的检测下限分别可达4 copies/μL和5 copies/μL，对艰难梭菌以外其他常见肠道菌群的检测均为阴性。 重复性检测结果显示，批间和批内变异系数均 结论  针对耐莫西沙星艰难梭菌gyrA基因点突变建立的双重荧光定量PCR方法，灵敏且具有很高的特异性和重复性，可有效鉴别艰难梭菌莫西沙星敏感株和耐药株，并可辅助识别流行株BI/NAP1/RT027的暴发。