Modèles de cultures cellulaires kératinocytaires de prépuce. Possibilité d’application chez les enfants brûlés

Resume But de l’etude Nous avons teste la capacite de division et de differenciation cellulaire in vitro des keratinocytes issus de prepuce. Materiels et methodes Pendant une periode de 12 mois et apres l’autorisation des parents, nous avons recupere 18 pieces operatoires preputiales. L’âge moyen des enfants operes etait de quatre ans. Les keratinocytes ont ete isoles apres traitement de la peau par la thermolysine et la trypsine. Apres les procedures de filtration, de centrifugation et de numerotation, nous avons mis les keratinocytes en culture monocouche. Parallelement, des treillis de collagene contenant des fibroblastes humains ont ete realisees. Les keratinocytes ont ete ensemences a la surface des treillis. Apres neuf jours de culture, les « tissus » ont ete fixes pour analyses histologiques et immunohistologiques qui permettaient de mettre en evidence les marqueurs caracteristiques de la differenciation epidermique. Resultats Nous avons obtenu une moyenne de 8,8/10 6 de cellules par piece operatoire. Apres sept jours de culture, nous avons obtenu en moyenne 23,7/10 6 de cellules par culture. Au contact des treillis de collagene, nous avons obtenu une culture cellulaire pluristratifiee et nous avons mis en evidence les marqueurs de la differenciation keratinocytaire (la filaggrine, la loricrine et la transglutaminase) ainsi que les marqueurs de la jonction dermoepidermique (collagene VII et laminine V). Conclusion Les keratinocytes issus de prepuce possedent une grande capacite de division. Ces cellules peuvent se diviser longtemps avant d’entrer en differenciation. Les constatations obtenues lors de ce travail, nous permettent de proposer a nos patients de realiser le prelevement preputial pour utiliser les keratinocytes dans la couverture d’une perte de substance epidermique, particulierement chez les enfants brules.