活性维生素D3联合力学拉伸对成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化及OPG和RANKL表达的影响

目的 体外模拟成骨细胞在体内的生存环境,考察活性维生素D3（VD3）、力学拉伸以及两者联合对成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化及破骨细胞抑制因子（OPG）和破骨细胞分化因子（RANKL）表达的影响.方法 将10 nmol/LVD3、间断性力学拉伸以及两者联合作用于成骨细胞.流式细胞术检测细胞增殖.荧光探针试剂盒检测碱性磷酸酶（ALP）活性.实时定量PCR检测核心转录因子Runx2、OPG、RANKL mRNA水平,Western blotting检测其蛋白表达.结果 VD3抑制成骨细胞增殖,力学拉伸不能改变这种抑制效应.力学拉伸和VD3单独作用成骨细胞均能增加ALP活性及提高ALP、Runx2 mRNA水平,但当联合刺激后这些指标均降低,且成强度依赖性.力学拉伸增加OPG/RANKL比值,增强成骨作用,联合VD3后,OPG/RANKL比值下降.结论 力学拉伸能有效诱导成骨分化,增加骨形成.VD3与力学拉伸联合抑制成骨细胞增殖和分化,并通过增加RANKL表达而影响骨重建.研究结果为骨质疏松及相关骨疾病的理论和治疗提供有意义的探索.