微RNA-141靶向 Dlx5 基因对骨形态发生蛋白2诱导人主动脉瓣钙化的调控作用

目的探讨miRNA-141对骨形态发生蛋白2（BMP-2）诱导人主动脉瓣钙化的调控作用及机制。 方法收集24例人退行性主动脉瓣，用qRT-PCR及蛋白质印迹法检测miRNA-141和BMP-2的mRNA及蛋白表达水平。在人主动脉瓣膜间质细胞（HAVIC）中上/下调miRNA-141表达，通过Von Kossa染色比较细胞钙化，并比较远端缺失同源盒5（Dlx5）mRNA和BMP-2蛋白表达；双荧光素酶报告基因实验验证Dlx5是否为miRNA-141的靶基因。在主动脉瓣钙化小鼠和Dlx5基因敲除主动脉瓣钙化小鼠中，上/下调miRNA-141表达，通过Von Kossa染色比较主动脉瓣钙化，并检测BMP-2蛋白表达。 结果与正常主动脉瓣膜组织相比，人退行性主动脉瓣miRNA-141的表达降低（1.00±0.02 vs 0.35±0.06，P=0.01），BMP-2的mRNA及蛋白表达增加（P均=0.01）。在HAVIC中，上调/下调miRNA-141可抑制/促进钙化（P=0.02或P=0.01），并降低/升高Dlx5 mRNA表达（P均=0.01）及BMP-2蛋白的表达（P=0.02或P=0.01）。双荧光素酶报告基因实验验证了Dlx5为miRNA-141的靶基因。上调/下调主动脉瓣钙化小鼠miRNA-141可抑制/促进钙化（P均=0.01），并降低/升高Dlx5、BMP-2 mRNA及蛋白的表达（P均 结论miRNA-141靶向Dlx5基因抑制BMP-2蛋白诱导的人主动脉瓣钙化。