LC-ESI-MS/MS测定苦参碱及其在HepG2细胞模型中的摄取特性

目的：建立灵敏、快速和高效的LC-ESI-MS/MS法测定HepG2细胞中苦参碱浓度,研究苦参碱在HepG2细胞上的摄取转运特性。方法：Hanbon Megres C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相10 mmol·L^-1乙酸铵溶液（含0.1%甲酸）-甲醇（35∶65）;质谱采用正离子气动辅助电喷雾离子化（ESI）,选择性反应监测（SRM）测定药物。以HepG2细胞作为体外模型,考察温度、药物浓度和多特异性有机阳离子转运系统的经典抑制剂对苦参碱在HepG2上摄取的影响。结果：HepG2细胞裂解液中苦参碱在0.05-50.0 nmol·L^-1线性关系良好,最低定量限为0.05 nmol·L^-1。与37℃相比,苦参碱在4℃时的HepG2细胞摄取量显著下降（P〈0.001）。孵育液中药物浓度由0.5μmol·L-1增加到400μmol·L^-1时,苦参碱的摄取率显著下降（P〈0.01）。与抑制剂吡拉明、维拉帕米、奎尼丁和苯海拉明共孵育时,苦参碱的细胞摄取均显著下降（P〈0.001）。结论：该法简便、快速、灵敏,可用于研究苦参碱在HepG2细胞中的摄取特性。苦参碱进入肝细胞以主动转运为主,其中多特异性有机阳离子转运系统介导的摄取转运是主要途径。