Interactions de la g-actine avec la tete globulaire de la myosine

Nous avons prepare un derive d'actine non polymerisable en presence de sels et de myosine-s1. Cette propriete est due a l'etablissement de ponts intramoleculaires induits par un agent heterobifonctionnel: le m-maleimidobenzoyl-n-hydroxysuccinimide ester (mbs). Le derive proteique (mbs-g-actine) a ete caracterise et utilise comme analogue soluble et stable de la f-actine pour etudier et definir, pour la premiere fois, les proprietes d'interaction en solution entre la g-actine et la tete globulaire de la myosine. L'etude physico-chimique de la mbs-g-actine suggere que les proprietes structurales et fonctionnelles de la g-actine ne sont pas alterees par la modification chimique. Plusieurs approches experimentales ont permis de mettre en evidence la formation des complexes binaire et ternaire mbs-g-actine-s1 et dnase 1-mbs-g-actine-s1, respectivement. La production de ce dernier permet d'envisager l'etude cristallographique du complexe actomyosine. Enfin, pour la premiere fois, la condensation covalente de la mbs-actine avec le s1, par l'intermediaire de son bras maleimide, implique directement le thiol sh1 situe au niveau du domaine 20 kda qui forme un site unique avec la region covalemment liee a la mbs-actine au niveau du domaine 50 kda