Caracterización de la aparición y desarrollo de tolerancia a la morfina en un modelo de inflamación monoarticular en ratón

Los opioides se utilizan en el tratamiento del dolor osteoarticular cronico, pero se desconocen las caracteristicas de aparicion de tolerancia a sus efectos durante estos procesos. Postulamos que la inflamacion puede alterar la aparicion / desarrollo de tolerancia opioide ya que se inducen cambios en la transmision nociceptiva y en la expresion de receptores opioides. METODOLOGIA: En un modelo de monoartritis producida por adyuvante de Freund (CFA) en ratones control y tolerantes (con la implantacion de un comprimido s.c. de morfina), se evaluaron: peso corporal, diametro de la articulacion, respuesta nociceptiva a estimulos termicos (plantar test) y mecanicos (Randall y Selitto, Von Frey), extravasacion de plasma y transito intestinal. Tambien se estudiaron los efectos de la administracion sistemica de morfina y la reversion por naloxona y naloxona metiodada. Finalmente se estudio la expresion de receptores opioides m en tejidos perifericos (plantar, ganglios de la raiz dorsal y medula espinal) mediante Western Blot. RESULTADOS: El CFA indujo una inflamacion localizada, cuantificable entre las 4 horas y los 14 dias. El efecto anti-nociceptivo y anti-inflamatorio de la morfina fue significativamente mayor en presencia de inflamacion (x2), sin modificar el efecto anti-alodinico. La implantacion de un comprimido de morfina produjo una disminucion de la sensibilidad nociceptiva a los estimulos termicos y mecanicos, induciendo tolerancia opioide a los efectos anti-nociceptivos y anti-inflamatorios de la morfina. Asimismo en presencia de inflamacion el desarrollo de tolerancia fue mayor. Los resultados de conducta obtenidos se relacionaron con los obtenidos a nivel molecular. La inflamacion periferica aumento la expresion de receptores opioides, y en presencia de tolerancia a la morfina los resultados sugirieron la no-funcionalidad de estos receptores. Opioids are clinically used in the management of chronic osteoarticular pains, but tolerance to analgesia has not been reported. The aim of our study was to characterise morphine tolerance in a mice model of monoarthritis that mimics the clinical condition. We postulate that inflammation could alter the development of opioid tolerance, because of the changes induced in the nociceptive transmission and opioid-receptor expression. METHODS: Inflammation was induced by the subplantar injection of Freunds adjuvant (CFA) in control and tolerant mice (tolerance was induced by the subcutaneous implantation of a 75-mg morphine pellet). We assessed changes in body weight, paw diametre, nocicpetive response to thermic (plantar test) and mechanic (Randall & Selitto, Von Frey) estimoulous, plasma extravasation and gastrointestinal transit. We also studied the anti-hyperalgesic (thermal, mechanical), anti-allodynic and anti-extravasation effects of morphine and its reversibility with morphine antagonists (naloxone), and the expression of m opioid receptors (western blot) in paw tissue, dorsal root ganglia and spinal cord. RESULTS: CFA-inflammation induced a localised inflammation, from 4 hours to 14 days since the injection of CFA. Inflammation increased the anti-nociceptive and anti-inflammatory effects of acute morphine (x2), without modify the anti-allodynic effects. The implantation of a morphine pellet decreased nociceptive sensibility, inducing tolerance to anti-nociceptive and anti-inflammatory effects, demonstrating tolerance. Inflammation and sustained exposure (pellet) to morphine, each individually, similarly increased m opioid receptor levels in all tissues tested; in the paw, opioid receptors expression was further enhanced in the presence of inflammation plus tolerance. The results suggested an up-regulation of non-functional m opioid receptors in tolerant mice, with and without inflammation.