[Effect of chondrogenesis related miR-4287 on expression of aggrecanase-1 in human chondrocytes].

2017 
目的: 探讨成软骨相关 miR-4287 对人软骨细胞聚蛋白多糖酶-1(a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motif 4,ADAMTS4)调控作用及其机制。. 方法: 取自愿捐赠的膝关节正常及骨关节炎软骨组织,采用实时荧光定量 PCR 检测 miR-4287 和 ADAMTS4 mRNA 表达量;然后分离培养软骨细胞,取第 1 代骨关节炎细胞,给予 IL-1β 处理,观察其对软骨细胞 miR-4287 和 ADAMTS4 mRNA 表达的影响;分别给予 MAPK 信号通路抑制剂 SP600125 以及 NF-κB 信号通路抑制剂 SN50 预处理后联合 IL-1β 刺激,观察 IL-1β 介导的信号通路对软骨细胞 miR-4287 和 ADAMTS4 mRNA 表达的影响;分别转染 miR-4287 模拟物及其阴性对照、miR-4287 抑制物及其阴性对照,观察 miR-4287 调控软骨细胞 ADAMTS4 mRNA 及蛋白的表达。荧光素酶报告实验验证 miR-4287 与 ADAMTS4 mRNA 3’非翻译区(untranslated region,UTR)的直接结合效应。. 结果: 与正常软骨组织比较,骨关节炎软骨组织 miR-4287 相对表达量下降,ADAMTS4 mRNA 相对表达量上升,比较差异有统计学意义( P 0.05)。. Conclusion: miR-4287, a chondrogenesis associated microRNA, may play an important role in cartilage degeneration. miRNA-4287 is able to regulate ADAMTS4 expression in human chondrocytes, but not by means of directly targeted the ADAMTS4 mRNA 3'UTR. The exact mechanisms need to be further addressed.
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