The acrosomal membrane system of boar spermatozoa--morphological and biochemical studies.

Summary The distribution of the cell surface saccharides with α-glycosidically linked mannose and terminal galactose was displayed by fluorescence microscopical examinations with FITC-conjugated concanavalin A and Ricinus communis agglutinin-120. The lectin binding sites of the inner cellular membranes - inner and outer acrosomal membrane - were ultra-structurally localized by electron microscopical studies using the lectin-peroxidase technique. It could be demonstrated that both acrosomal membranes contain covalently bound carbohydrates. In order to characterize the acrosomal membrane components which are responsible for the binding to lectins, the outer acrosomal membrane was separated after homogenization by centrifugation through modified colloidal silica. The exposed membrane proteins were labelled by galactose oxidase mediated introduction of tritium into the carbohydrate side chains of the glycoproteins. After solubilization the membrane components were analysed by affinity chromatography and electrophoresis. For a general characterization the cholesterol/phospholipid ratio of ejaculated boar spermatozoa and the isolated membrane fraction was determined and some enzymatic activities were assessed. Das akrosomale Membransystem von Eberspermatozoen - morphologische und biochemische Studien Zusammenfassung Die Verteilung von zelloberflachengebundenen Kohlenhydraten mit α-glycosidisch gebundener Mannose und Galactose wurde mit Hilfe von FITC-Con A und FITC-RCA-120 untersucht. Die Lektin-Bindungsstellen der inneren und auseren akrosomalen Membranen wurden elektronenmikroskopisch dargestellt. Es konnte gezeigt werden, das beide akrosomalen Membranen kovalent gebundene Zucker besitzen. Zur Charakterisierung der fur die Lektinbindung verantwortlichen Komponenten wurde die ausere akrosomale Membran durch Zentrifugation durch modifiziertes, kolloidales Kieselgel isoliert und nach Markierung der exponierten Kohlenhydratseitenketten mit Tritium mittels SDS-Elektrophorese und Affinitatschromatographie an Lektinen untersucht. Zur allgemeinen Charakterisierung der isolierten auseren Membran wurden sowohl der Cholesterin- und Phospholipid-Gehalt bestimmt als auch einige enzymatische Aktivitaten gemessen.