叶酸生物合成途径中调控基因 folB 表达载体的构建及在大豆中的转化

叶酸是一种水溶性 B 族维生素，是维持人体正常活动所必需的营养元素之一，也是植物体内参与 一碳单元反应的重要辅酶。folB 基因是叶酸调控基因，来源于拟南芥，调控叶酸合成途径中的关键酶 DHNA 的生成。本研究将人工合成的 folB 基因转入大豆受体材料 Williams82 中。共侵染 200 个大豆外植体，得到 26 株转化苗。通过对转化苗的草丁膦(浓度150 mg/L)涂抹鉴定，获得 16 株除草剂抗性转化苗。通过 PCR 检测， 得到 12 株 PCR 阳性转化苗。经过 bar 试纸条检测，其中 10 株为阳性。Southern 杂交结果表明，9 株转化苗为 Southern 杂交阳性。研究结果表明：外源功能基因 folB 和筛选标记基因 bar 已经整合到大豆基因组中。相应 的转基因后代表现出除草剂抗性和 folB 基因 Southern 杂交阳性。本研究通过将 folB 基因转入大豆，获得了 转基因后代，以此为基础可进一步选育高叶酸含量的转基因大豆品种。