β-TrCP-OD-HA重组腺病毒对白血病K562细胞凋亡的影响

目的研究癌蛋白Bcr-Abl被泛素．蛋白酶体系统靶向降解的可能性及诱导白血病K562细胞凋亡的作用。方法含有Bcr-Abl融合蛋白N端寡聚化区（OD）的重组腺病毒Ad58-TrCP-OD-HA特异性结合Bcr-Abl融合蛋白的N端寡聚化区（OD），通过感染将嵌合泛素连接酶β-TrCP运送到靶细胞K562细胞，同时，β-TrCP基因突变的重组腺病毒AdS△F-TrCP-OD-HA和仅含绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒Ad5GFP，分别作为对照。感染后，Westernblot检测Bcr-Abl融合蛋白的表达；倒置显微镜、光镜和电镜观察细胞形态学变化。结果成功建立携β-TrCP-OD-HA、AF-TrCP-OD-HA的重组腺病毒的K562细胞株，重组腺病毒感染K562细胞后，AdS-TrCP-OD-HA组的Bcr-Abl融合蛋白含量下降，与Ad5β-TrCP-OD-HA组、AdSGFP组及对照组相比，差异具有统计学意义（P〈0．05）；倒置显微镜可见Ad5-TrCP-OD-HA作用后细胞体积变小、形态不规则；光镜下发现胞体变小，细胞质空泡，细胞核出现碎裂和凋亡小体；电镜观察到出现了典型的细胞凋亡的超微结构。结论重组腺病毒介导的β-TrCP-OD-HA在白血病K562细胞内能够降低Bcr-Abl融合蛋白含量，并且诱导K562细胞发生了凋亡。