Production de mutants perte de fonction chez la noctuelle ravageur de culture, Spodoptera frugiperda grâce à CRISPR/Cas9

Spodoptera frugiperda est un insecte ravageur de culture polyphage qui cree d’importants degâts sur le continent americain. Depuis quelques annees, elle est devenue invasive en Afrique et en Asie et pourrait bientot atteindre l’Europe. Pour mieux controler ce ravageur, de nouveaux moyens de lutte doivent etre proposes aux agriculteurs. L’UMR DGIMI etudie les mecanismes d’interactions entre cette noctuelle, son cortege de pathogenes/parasites et sa plante hote. Nous essayons notamment d’identifier des facteurs clefs impliques dans les defenses immunitaires des insectes ou dans leur adaptation a la plante. Le RNAi n’etant pas fonctionnel chez les lepidopteres, nous ne disposions pas jusqu’alors d’outils de validation fonctionnelle de genes in vivo chez Spodoptera frugiperda. Dans ce poster, nous vous presentons la mise en place de l’outil d’edition de genome CRISPR/Cas9 chez Spodoptera frugiperda. Nous avons genere deux lignees d’insectes portant chacune une mutation perte-de-fonction dans l’un des deux genes pro-phenoloxidase (Sf-PPO1 et Sf-PPO2). L’activite de l’enzyme active issue du clivage de PPO, la phenoloxidase, est fortement diminuee dans l’hemolymphe des deux lignees mutantes comparee a celle observee dans l’hemolymphe de larves sauvages. L’outil « CRISPR/Cas9 » est donc fonctionnel chez Spodoptera frugiperda et les deux lignees obtenues vont maintenant nous permettre de mieux caracteriser le role de chacune des PPO dans l’interaction de cet insecte avec les differents pathogenes etudies au sein de l’unite DGIMI.