VEGF-C siRNA载体构建及其对转染食管癌细胞中VEGF-C表达的影响

目的观察小分子干扰RNA（siRNA）对人食管癌细胞EC9706中血管内皮生长因子C（VEGF-C）表达的抑制作用。方法根据siRNA设计原则,针对人VEGF-C cDNA序列设计并合成编码siRNA的寡核苷酸序列,并将其克隆入siRNA表达载体,构建重组质粒。将重组质粒转染入EC9706细胞株,通过免疫组织化学、RT-PCR和原位杂交法检测转染细胞中VEGF-C蛋白和mRNA的表达。结果正常未转染（对照组）和无关序列转染（无关序列组）EC9706中,均有大量VEGF-C蛋白阳性棕色颗粒、mRNA阳性条带和紫蓝色阳性颗粒,而在siRNA转染EC9706（siRNA1～3组）中,仅有少量弱表达颗粒和较弱的阳性条带,与对照组和无关序列组相比,P均〈0.01。结论成功构建了VEGF-C siRNA载体。此载体能有效抑制人食管癌细胞EC9706中VEGF-C的表达,其可能成为抗食管癌淋巴管生成的一种新方法。